რატომ გამოიყენება არჩევითი საკვები ნივთიერებები? არჩევითი კულტურის მედია

მიკრობიოლოგიაში საკვები ნივთიერებები არის სუბსტრატები, რომლებზეც იზრდება მიკროორგანიზმები და ქსოვილების კულტურები. ისინი გამოიყენება დიაგნოსტიკური მიზნებისთვის, მიკროორგანიზმების სუფთა კულტურების იზოლაციისა და შესწავლისთვის, ვაქცინებისა და მედიკამენტების წარმოებისთვის და სხვა ბიოლოგიური, ფარმაცევტული და სამედიცინო მიზნებისთვის.

მიკრობიოლოგიური კულტურის მედიის კლასიფიკაცია

მიკრობიოლოგიაში საკვები ნივთიერებები იყოფა:
- განსაზღვრული და განუსაზღვრელი შემადგენლობის გარემო;
- ნატურალური, ნახევრად სინთეზური და სინთეზური;
- ძირითადი, დიაგნოსტიკური, არჩევითი;
- მკვრივი, ნახევრად თხევადი, თხევადი, მშრალი, მარცვლოვანი.

ბუნებრივი საკვები ნივთიერებები არის ის საშუალებები, რომლებიც მიიღება ბუნებრივი მასალისგან: სისხლი, ხორცი, ცილები, ცხოველთა ორგანოები, მცენარეული ექსტრაქტები და მცენარეული მასალები. ასეთი საშუალებების მაგალითებია ხორცის ბულიონი, შრატი, ლუდის ვორტი, თივის ინფუზიები, აგარ-აგარი, სისხლი და ნაღველი. ბუნებრივი გარემო ეხება გაურკვეველი შემადგენლობის მქონე გარემოს, რომელსაც სხვადასხვა დროს შეიძლება ჰქონდეს გარკვეული კომპონენტების განსხვავებული რაოდენობა.

ნახევრად სინთეზური საშუალებები ასევე განიხილება გაურკვეველი შემადგენლობის მედია. ისინი მზადდება ბუნებრივი საკვები ნივთიერებების საფუძველზე, მაგრამ მათ ემატება ნივთიერებები, რომლებიც უზრუნველყოფენ კულტურების აქტიურ რეპროდუქციას. კულტურები იზრდება ნახევრად სინთეზურ გარემოზე ვიტამინების, ამინომჟავების და ანტიბიოტიკების წარმოებისთვის სამრეწველო ფარმაცევტული საშუალებებისთვის.

სინთეზური საშუალებები მზადდება ცნობილი შემადგენლობის ინგრედიენტებისგან, ცნობილი კონცენტრაციითა და თანაფარდობით, ამიტომ ეს საშუალებები მიეკუთვნება გარკვეული შემადგენლობის მედიას. მათი დახმარებით ისინი სწავლობენ მიკროორგანიზმების მეტაბოლიზმს, მათ ბიოლოგიურ და ფიზიოლოგიურ თვისებებს და ნივთიერებების მიღების შესაძლებლობას, რომლებიც თრგუნავენ ან, პირიქით, ასტიმულირებენ მათ განვითარებას.

ძირითადი, არჩევითი და დიაგნოსტიკური კულტურის მედია

ძირითადი საშუალებები გამოიყენება სხვადასხვა მიკრობული კულტურების გასაზრდელად, ასევე არჩევითი და დიაგნოსტიკური საშუალებების მისაღებად. ძირითადი მედია, მაგალითად, მოიცავს ხორცის ბულიონს, ხორცის აგარს, ვორტი და ჰოტინგერის ბულიონს. სხვადასხვა კულტურებისთვის, ზოგიერთ კომპონენტს ემატება ძირითადი საშუალებები ზრდის სტიმულირებისთვის - ეს შეიძლება იყოს ვიტამინები, ამინომჟავები და ბუნებრივი ექსტრაქტები. ამრიგად, ყივანახველას გამომწვევი აგენტი იზრდება საშუალოზე სისხლის დამატებით.

არჩევითი მედია - ბიოლოგიური კულტურების სელექციური (შერჩევითი) კულტივაციის მედია. გარემოს შემადგენლობა შეირჩევა ისე, რომ იყოს ოპტიმალური ერთი სახეობის ან მჭიდროდ დაკავშირებული ბაქტერიების ჯგუფისთვის და თრგუნავს სხვა სახეობების ბაქტერიების განვითარებას. მაგალითად, ნატრიუმის ქლორიდის დამატება გარემოში გარკვეული კონცენტრაციით აფერხებს ყველა ბაქტერიის ზრდას სტაფილოკოკის გარდა. არჩევითი კულტურების დახმარებით მიიღება სუფთა კულტურები შემდგომი გამრავლებისა და დაგროვებისთვის.

მიკროორგანიზმების იდენტიფიცირებისთვის გამოიყენება დიაგნოსტიკური საშუალებები. გარემოში ცვლილებებისა და მისი ქიმიური შემადგენლობის (საშუალების ფერის ცვლილება, გაზის ბუშტების გაჩენა და ა.შ.) საფუძველზე განისაზღვრება ბაქტერიის ტიპი. ასეთ მედიას ხშირად ემატება ქიმიური ინდიკატორის საღებავები, როგორიცაა ბროლის იისფერი, მალაქიტის მწვანე, მეთილენის ლურჯი, ფუსინი და სხვა. ისინი ეხმარებიან ახლო კულტურების განცალკევებას. მაგალითად, ვარდისფერ ენდო მედიუმში, რომელიც შეფერილია ფუზინით, E. coli აყალიბებს წითელ კოლონიებს, ხოლო ტიფის და დიზენტერიის ბაქტერიების კოლონიები უფეროა.

ბაქტერიოლოგიური კვლევის საფუძველია საკვები ნივთიერებები. ისინი ემსახურებიან მიკრობების სუფთა კულტურების გამოყოფას შესასწავლი მასალისგან და მათი თვისებების შესწავლას. მკვებავი მედია ქმნის ოპტიმალურ პირობებს მიკროორგანიზმების გამრავლებისთვის. მედია უნდა შეიცავდეს ციტოპლაზმის ყველა კომპონენტის ასაგებად აუცილებელ ნივთიერებებს, ე.ი. ცოცხალი ორგანიზმის ზრდის ყველა წყარო. ეს ძირითადად მოიცავს აზოტის, ნახშირბადის, წყალბადის და ჟანგბადის წყაროებს.

წყალბადის და ჟანგბადის წყარო საკვებ ნივთიერებებში წყალია. აზოტის წყარო არის ორგანული ნაერთები, რომლებიც მიიღება ხორციდან, თევზიდან, პლაცენტიდან, რძით, კვერცხიდან და სისხლიდან. პანკრეატინით ან ტრიპსინთან ჰიდროლიზის შედეგად ეს პროდუქტები წარმოქმნიან ე.წ. ჰიდროლიზატები, რომლებიც შეიცავს დიდი რაოდენობით ამინომჟავებს და პეპტონებს, რომლებიც კარგად შეიწოვება მიკროორგანიზმების უმეტესობის მიერ. მშობლიური ცილა შეიწოვება მხოლოდ ზოგიერთი მიკროორგანიზმების მიერ, რომლებსაც აქვთ ეგზოპროტეაზები. ჰიდროლიზატები მრავალი მიკროორგანიზმისთვის მედიის მომზადების საფუძველია.

პათოგენური მიკრობების ნახშირბადის წყარო ძირითადად სხვადასხვა ნახშირწყლებია: მონო- და დისაქარიდები, პოლიჰიდრული სპირტები, ორგანული მჟავები და მათი მარილები.

გარდა ორგანოგენებისა, ბაქტერიებს ესაჭიროებათ ფოსფორის, კალიუმის, გოგირდის, ნატრიუმის, მაგნიუმის, რკინის შემცველი არაორგანული ნაერთები, აგრეთვე მიკროელემენტები: კობალტი, იოდი, მანგანუმი, ბორი, თუთია, მოლიბდენი, სპილენძი და ა.შ.

მიკროორგანიზმების მოთხოვნილება არაორგანულ ნაერთებზე დაკმაყოფილებულია მარილების KH2PO4 K2HPO4 და სხვა ნივთიერებების დამატებით საკვებ გარემოში მიკროელემენტები, რომლებიც მოქმედებენ როგორც კატალიზატორები ქიმიური პროცესებისთვის, საჭიროა უმნიშვნელო რაოდენობით და შედიან საკვებ გარემოში პეპტონთან, არაორგანულ მარილებთან და წყალთან ერთად. ჩამოთვლილ ორგანულ ელემენტებთან ერთად ბევრ მიკროორგანიზმს ესაჭიროება ზრდის ფაქტორები, ე.ი. ნივთიერებებში, რომლებსაც თავად ვერ ასინთეზებენ. ზრდის ფაქტორები უნდა დაემატოს მკვებავ მედიას მზა ფორმით. ზრდის ფაქტორებს მიეკუთვნება სხვადასხვა ვიტამინები, რომელთა წყარო საკვებ გარემოში არის მცენარეული და ცხოველური წარმოშობის პროდუქტები, რომლებიც დამატებულია საკვებ გარემოში, შეიცავს ნიკოტინურ, პანტოტენურ, პარაბენზოურ მჟავებს, ვიტამინებს A, B, C და ა.შ.

ნუტრიენტები მიკრობებს შეუძლიათ შეიწოვება მხოლოდ გარკვეული გარემო რეაქციის პირობებში, რადგან მიკრობული უჯრედის მემბრანების გამტარიანობა იცვლება გარემოს pH-ის მიხედვით.

მოთხოვნები საკვები ნივთიერებების მიმართ.

1. კულტივირების საშუალებები უნდა შეიცავდეს მიკრობების გამოსაკვებად აუცილებელ საკვებ ნივთიერებებს.

2. აქვს pH რეაქცია, რომელიც ოპტიმალურია გაშენებული მიკრობის ტიპისთვის. -

3. მკვებავ გარემოს უნდა ჰქონდეს საკმარისი ტენიანობა და სიბლანტე, რადგან მიკრობები იკვებებიან დიფუზიისა და ოსმოსის კანონების მიხედვით.

4. იყოს იზოტონური და ჰქონდეს გარკვეული რედოქს პოტენციალი (rH2).

5. კულტურის მედია უნდა იყოს სტერილური, რაც უზრუნველყოფს სუფთა კულტურების ზრდის შესაძლებლობას.

სხვადასხვა ტიპის მიკრობებისთვის საკვები ნივთიერებებისა და ფიზიკური პირობების საჭიროება არ არის ერთნაირი და ეს გამორიცხავს უნივერსალური მკვებავი გარემოს შექმნის შესაძლებლობას.

კონსისტენციის მიხედვით, არსებობს მყარი და თხევადი საკვები ნივთიერებები. მკვრივებს ამზადებენ თხევადი საფუძველზე წებოვანი ნივთიერებების დამატებით: აგარ-აგარი ან ჟელატინი! აგარ-აგარი (მალაიურად ჟელე) მცენარეული წარმოშობის პროდუქტია, მოპოვებული ზღვის მცენარეებიდან. აგარ-აგარი იხსნება წყალში 80-86°C ტემპერატურაზე, მკვრივდება 36-40-ზე და ამიტომ გამოიყენება მკვებავი საშუალებების კომპაქტურად მიკროორგანიზმების სხვადასხვა ჯგუფის ოპტიმალურ ტემპერატურაზე გასაზრდელად.

საკვები ნივთიერებების კლასიფიკაცია ხდება მათი შემადგენლობისა და დანიშნულების მიხედვით

1.შემადგენლობის მიხედვით საკვები ნივთიერებები იყოფა მარტივ და რთულად

არსებობს ზოგადი დანიშნულების გარემოს ჯგუფი - მარტივი. ამ ჯგუფში შედის ხორც-პეპტონის ბულიონი (მარტივი საკვები ბულიონი), ხორც-პეპტონ აგარი (მარტივი საკვები აგარი), მკვებავი ჟელატინი. ეს საშუალებები გამოიყენება მრავალი პათოგენური მიკრობების გასაშენებლად. ზოგადი დანიშნულების საშუალებები, ან მარტივი საკვები ნივთიერებები, ჩვეულებრივ მზადდება ჰიდროლიზატებისგან პეპტონისა და ნატრიუმის ქლორიდის დამატებით. ისინი ასევე გამოიყენება როგორც რთული მედიის მომზადების საფუძველი.

2. მეორე ჯგუფში შედის არჩევითი, სპეციალური და დიფერენციალური დიაგნოსტიკური გარემო.

არჩევითი გარემო (შერჩევითი, შერჩევითი, დაგროვება, გამდიდრება). შერჩევითი საკვები ნივთიერებების შექმნის პრინციპი ემყარება მიკრობის იმ ტიპის ძირითადი ბიოქიმიური და ენერგეტიკული მოთხოვნილებების დაკმაყოფილებას, რისთვისაც ისინი განკუთვნილია კულტივირებისთვის, ან ინჰიბიტორების დამატებაზე, რომლებიც თრგუნავენ თანმხლები მიკროფლორის ზრდას. საკვები ნივთიერებების, მიკროელემენტების, ზრდის ფაქტორების გარკვეული შემადგენლობა და კონცენტრაცია მკაცრად განსაზღვრული pH მნიშვნელობით ან ინჰიბიტორების დამატება უზრუნველყოფს ოპტიმალურ პირობებს ერთი ან რამდენიმე ტიპის მიკროორგანიზმების გაშენებისთვის. მათზე სხვადასხვა მიკრობების ნარევის შემცველი მასალის დათესვისას, პირველ რიგში, გაქრება იმ სახეობების ზრდა, რომელთათვისაც გარემო შერჩევითი იქნება. არჩევითი საშუალებების მაგალითებია ყვითელის ბულიონი, სელენიტის ბულიონი, პლოსკირევის საშუალება ნაწლავის ოჯახის მიკრობების გასაშენებლად, ტუტე პეპტონური წყალი Vibrio cholerae-სთვის.

იოგის ბულიონი. MPB-ს ემატება 10-20% ხარის ნაღველი. ნაღველი თრგუნავს კოკებისა და საჰაერო ფლორის ზრდას, მაგრამ ხელსაყრელია სალმონელას გამრავლებისთვის.

სელენიტის ბულიონი. იგი შედგება ფოსფატის ბულიონისგან სელენიტის ნატრიუმის მარილის დამატებით, რომელიც არის კოკულარული ფლორისა და ეშერიხია კოლის ზრდის ინჰიბიტორი, მაგრამ არ აფერხებს სალმონელას ზრდას.

ოთხშაბათი პლოსკირევა. მკვრივი გარემო, რომელიც შეიცავს E. coli, coli-ს ინჰიბიტორებს, მაგრამ ხელსაყრელია შიგელასა და სალმონელას ზრდისთვის, რომელთა რეპროდუქციას არ აფერხებს ბრწყინვალე მწვანე და ნაღვლის მარილები.

პეპტონი წყალი. შეიცავს 1% პეპტონს და 0,5% ნატრიუმის ქლორიდს. გარემო შერჩევითია ქლორის ვიბრიოებისთვის, რადგან ისინი უკეთესად მრავლდებიან, ვიდრე სხვა ბაქტერიები "მშიერ გარემოში", განსაკუთრებით ტუტე რეაქციით, რადგან ისინი თავად გამოყოფენ მჟავე ნარჩენ პროდუქტებს.

განსაკუთრებული გარემო. აუცილებელია ბაქტერიების გაშენებისთვის, რომლებიც არ იზრდებიან უბრალო მკვებავ გარემოზე. ზოგიერთი ორგანიზმისთვის აუცილებელია ნახშირწყლების, სისხლის და სხვა დამატებითი საკვები ნივთიერებების დამატება მარტივ საკვებ ნივთიერებებში. მარტივი მკვებავი საშუალებების მაგალითებია შაქრის ბულიონი და შაქრის აგარი სტრეპტოკოკისთვის (მომზადებულია MPB-დან და MPA-დან, შესაბამისად, რომლებსაც ემატება 0,5-2% გლუკოზა).

პნევმოკოკებისა და მენინგოკოკებისთვის სპეციალური საშუალებაა შრატის ბულიონი და შრატის აგარი (შრატის ბულიონის მოსამზადებლად 1 წილი MPB ურევენ 2 წილ ახალ შრატს; შრატის აგარის მისაღებად 10-25% სტერილურ ცხენის ან მსხვილფეხა რქოსან შრატს უმატებენ გამდნარს. MPA).

დიფერენციალური დიაგნოსტიკური საშუალებები გამოიყენება შესწავლილი მიკრობის სახეობების დასადგენად, მისი მეტაბოლიზმის მახასიათებლების საფუძველზე“. მათი მიზნის მიხედვით, დიფერენციალური დიაგნოსტიკური გარემო იყოფა შემდეგნაირად:

1. მიკრობების პროტეოლიზური უნარის გამოვლენის საშუალება, რომელიც შეიცავს რძეს, ჟელატინს, სისხლს და ა.შ.

2. მედია ნახშირწყლებით და პოლიჰიდრული სპირტებით

სხვადასხვა საქაროლიზური ფერმენტების გამოვლენა.

დიფერენციალური დიაგნოსტიკური საშუალებების შემადგენლობას ემატება ინდიკატორები, რომლებიც შექმნილია საქაროლიზური თვისებების და რედოქს ფერმენტების იდენტიფიცირებისთვის: ნეიტრალური წითელი, მჟავა ფუქსინი, ბრომოთიმოლი ლურჯი, წყლიანი ლურჯი ვარდისფერი მჟავით (BP). მისი ფერის შეცვლით pH-ის სხვადასხვა მნიშვნელობებზე, ინდიკატორი მიუთითებს ფერმენტის არსებობაზე და გარემოში შეყვანილი ინგრედიენტის დაშლაზე.

დიფერენციალური დიაგნოსტიკური გარემოს მაგალითები:

ენდო გარემო. შედგება MPA-სგან 1% ლაქტოზის და ძირითადი ფუქსინის (ინდიკატორი) დამატებით, ნატრიუმის სულფიტით გაუფერულებული. Endo საშუალო აქვს ოდნავ ვარდისფერი ფერი. გამოიყენება ნაწლავური ინფექციების დიაგნოსტიკაში, რათა განასხვავოს ბაქტერიები, რომლებიც არღვევენ ლაქტოზას და წარმოქმნიან მჟავე პროდუქტებს ბაქტერიებისგან, რომლებსაც არ გააჩნიათ ეს უნარი. ლაქტოზადადებითი მიკრობების (Escherichia coli) კოლონიები წითელი ფერისაა ფუქსინის შემცირების გამო. ლაქტოზას უარყოფითი მიკროორგანიზმების - სალმონელას, შიგელას და სხვა კოლონიები უფეროა.

დიფერენციალური დიაგნოსტიკური გარემო მოიცავს მოკლე და გაფართოებულ ჭრელ სერიას. იგი შედგება ნახშირწყლების შემცველი მედიებისგან (Hiss media), MPB, რძე და ხორც-პეპტონი ჟელატინი.

ჰისის მედია მზადდება პეპტონ წყლის საფუძველზე, რომელსაც ემატება ქიმიურად სუფთა მონო-, დი- ან პოლისაქარიდები (გლუკოზა, ლაქტოზა, სახამებელი და სხვ.).

მჟავების წარმოქმნისა და ნახშირწყლების დაშლის შედეგად pH ცვლილებების დასადგენად, მედიას ემატება ინდიკატორი. ნახშირწყლების უფრო ღრმა დაშლით წარმოიქმნება აირისებრი პროდუქტები (CO2, CH4 და ა. ნახშირწყლების შემცველი საშუალებები ასევე შეიძლება მომზადდეს მკვრივი სახით - 0,5-1% აგარ-აგარის დამატებით. შემდეგ გაზის წარმოქმნა გამოვლინდება ბუშტების წარმოქმნით (შესვენებები) საშუალო სვეტში.

MPB-ზე, რომელიც ჭრელი სერიის ნაწილია, გვხვდება ამინომჟავების და პეპტონების (ინდოლი, წყალბადის სულფიდი) დაშლის დროს წარმოქმნილი პროდუქტები. წყალბადის სულფიდის აღმოჩენა ხდება ტყვიის აცეტატის ხსნარში გაჟღენთილი ფილტრის ქაღალდის ზოლის მოთავსებით კულტურის დათესვის შემდეგ MPB-ში. როდესაც გოგირდის შემცველი ამინომჟავები იშლება, წყალბადის სულფიდი გამოიყოფა და ქაღალდი შავდება ტყვიის სულფიდის წარმოქმნის გამო. რთული ინდიკატორი შეიძლება გამოყენებულ იქნას ინდოლის დასადგენად. ინდოლი წარმოიქმნება ტრიპტოფანის დაშლის შედეგად და შეიძლება გამოვლინდეს, როდესაც ეს მაჩვენებელი დაემატება MPB-ზე მოყვანილ კულტურას. ინდოლის თანდასწრებით, MPB ხდება მწვანე ან ლურჯი.

მშრალი გარემო.

მკვებავი აგარი, ისევე როგორც ძირითადი დიფერენციალური დიაგნოსტიკური საშუალებები, ამჟამად იწარმოება მშრალი პრეპარატების სახით, რომელიც შეიცავს ყველა საჭირო კომპონენტს. ასეთ ფხვნილებს მხოლოდ წყალი უნდა დაუმატოთ და ადუღოთ, შემდეგ კი ჩამოსხმის შემდეგ გაასტერილოთ.

კონსერვანტული კულტურის მედიახელს უშლის პათოგენების სიკვდილს და თრგუნავს საპროფიტების ზრდას. ყველაზე ფართოდ გამოიყენება გლიცერინის ნარევი (Tyga-ს გარემო), ჰიპერტონული ხსნარი, გლიცერინის კონსერვანტი LiCl2-ით, ნატრიუმის ციტრატის და ნატრიუმის დეოქსიქოლატის ხსნარი (Bengsang-Elliott-ის გარემო).

ბაქტერიების გამდიდრების საშუალება

გამდიდრების მედია(Მაგალითად, Kitta-Tarozzi გარემო, სელენიტის ბულიონი, თიოგლიკოლატი საშუალო) გამოიყენება ბაქტერიების გარკვეული ჯგუფის დასაგროვებლად ზოგიერთი სახეობისთვის ოპტიმალური და სხვებისთვის არახელსაყრელი პირობების შექმნით. ყველაზე ხშირად, ასეთ აგენტებად გამოიყენება სხვადასხვა საღებავები და ქიმიკატები - ნაღვლის მარილები, Na+ ტეტრათიონატი, K ტელურიტი, ანტიბიოტიკები, ფუქსინი, ჰენდიანი იისფერი, ბრწყინვალე მწვანე და ა.შ.

არჩევითი და შერჩევითი მკვებავი საშუალებები მზარდი ბაქტერიებისთვის

არჩევითი და შერჩევითი გარემო(Მაგალითად, გარემო უილსონ-ბლერი, ენდო, პლოსკირევი, მაკკონკი) განკუთვნილია მასალის პირველადი თესვისთვის ან კონსერვანტის ან გამდიდრების საშუალებების ხელახალი დათესვისთვის, სუფთა კულტურის მისაღებად. მედია მზადდება მიკროორგანიზმების ბიოქიმიური და ენერგეტიკული საჭიროებების გათვალისწინებით. შესაბამისად, სისხლისა და შრატის მედია იზოლირებულია (მაგ. ლეფლერი, ბორდე-გენგუ), კვერცხის მედია (მაგალითად, ლოვენშტეინ-იენსენი) და ა.შ.

მედია ანაერობული მიკრობების ზრდისთვის.ჩინეთის ხორც-პეპტონური ღვიძლის ბულიონი - Tarozzi (MPPB).ახალ ან გაყინულ ღვიძლს (სასურველია მსხვილფეხა რქოსანი პირუტყვისგან) ჭრიან წვრილად, ასხამენ თანაბარი რაოდენობით ონკანის წყალს, ადუღებენ ერთი საათის განმავლობაში, ფილტრავენ ბამბის მატყლში და ამატებენ მიღებული ექსტრაქტის 1 ნაწილს 3 წილ ხორც-პეპტონის ბულიონს. ნარევს ადუღებამდე აცხელებენ, უმატებენ ქიმიურად სუფთა სუფრის მარილს (1,25გრ 1 ლიტრ საშუალოზე) და pH-ს არეგულირებენ 7,6-7,8-მდე, შემდეგ ადუღებენ 15 წუთის განმავლობაში და ფილტრავენ ქაღალდის ან დატენიანებული ბამბის ფილტრით. გაფილტრულ ნახარშს უმატებენ წვრილად დაჭრილ ღვიძლს (1,5-2 გ), 1 ლიტრ ბულიონზე 100გრ ღვიძლს (პირველად ასუფთავებენ ღვიძლს და რეცხავენ წყლით). რამდენიმე ასეთ ნაჭერს ათავსებენ სინჯარაში, მაღალ სვეტში ასხამენ 7-10 მლ ბულიონს და ზედაპირზე ვაზელინს ან პარაფინის ზეთს აფენენ.

ბულიონი ღვიძლის ნაჭრებით სტერილიზდება 0,1 მპა ჭარბი წნევის ქვეშ ვ 30 წუთის განმავლობაში. იმისთვის, რომ საცდელი მილიდან ჟანგბადი ამოიღონ ინოკულაციამდე, გარემოს ადუღებენ 10 წუთის განმავლობაში და სწრაფად აციებენ წყლით.

ნახევრად მყარი აგარი ანაერობებისთვის. მპბ-ს ემატება 0,25-0,75% აგარ-აგარი და 1% გლუკოზა; გარემოს pH არის 7,4. საშუალო შეედინება საცდელ მილებში მაღალ სვეტებში. სტერილიზაცია ფრაქციულად მომდინარე ორთქლით 15-20 წუთის განმავლობაში 3 დღის განმავლობაში.

მედია რძემჟავა ბაქტერიების ზრდისთვის.რძე (მთელი).გააცხელეთ ადუღებამდე. ჩაასხით მილის ბოთლში და მოათავსეთ ცივ ადგილას 10-20 საათით, რომ კრემი დადებოდეს. ამ დროის გასვლის შემდეგ რძის უცხიმო ნაწილს მილის ონკანით ასხამენ საცდელ მილებში და იხურება ბამბის საცობებით. სტერილიზაცია ფრაქციულად 100°C-ზე სამი დღის განმავლობაში 20 წუთის განმავლობაში ან 112°C-ზე ერთხელ 30 წუთის განმავლობაში.

უცხიმო რძე. უცხიმო რძის მისაღებად, მთლიან რძეს გამოყოფენ და შემდეგ ამუშავებენ ისე, როგორც მთლიანი რძის გამოყენებისას.

ჰიდროლიზებული რძე (ბოგდანოვის მიხედვით).მიიღეთ 1 ლიტრი მოხარშული და 45°C-მდე გაცივებული უცხიმო რძე, დააყენეთ pH 7,6-7,8, დაამატეთ 0,5 გრ პანკრეატინის ფხვნილი (წინასწარ განზავებული მცირე რაოდენობით თბილ წყალში) ან 2-3 გრ დაქუცმაცებული პანკრეასი და რამდენიმე წუთის შემდეგ 5 მლ. ქლოროფორმის. ამის შემდეგ, ბოთლი კარგად შეირყევა, მჭიდროდ იხურება კორპის საცობით და 3 დღის განმავლობაში მოთავსებულია თერმოსტატში 40 ° C ტემპერატურაზე სითხის ყოველდღიური შერყევით. მითითებული პერიოდის შემდეგ ქლოროფორმის მოსაშორებლად ბოთლს ხსნიან, სითხეს ფილტრავენ და 2-3-ჯერ აზავებენ ონკანის წყლით. დაარეგულირეთ საშუალების pH 7.0-7.2-მდე და გაასტერილეთ.

ჰიდროლიზებული რძის აგარი.ჰიდროლიზებულ რძეს ემატება 1,5-2% აგარი, დნება, ასხამენ სინჯარებში და სტერილიზდება 0,1 მპა ჭარბი წნევის ქვეშ. ვ 15 წუთის განმავლობაში. რძემჟავა ბაცილები კარგად იზრდება ამ გარემოზე.

შრატის აგარი. 100 მლ ონკანის წყალს აიღეთ 7,5 გრ აგარი, ადუღეთ სანამ ბოლომდე არ დაიშლება, დაამატეთ წყალი თავდაპირველ მოცულობამდე (ანუ აორთქლებული წყლის მოცულობის ტოლი მოცულობით), დაამატეთ 400 მლ წინასწარ მომზადებული შრატი, დაასხით დნება. ადუღეთ ორთქლი 30 წუთის განმავლობაში, გაფილტრეთ ბამბის ფენით, ჩაასხით სინჯარებში დასტერილიზაცია 0,05 მპა წნევის ქვეშ 30 წუთის განმავლობაში.

კომბოსტო ოთხშაბათს. 200 გრ დაქუცმაცებულ კომბოსტოს (ან იონჯას) ასხამენ 100 მლ წყალში და ადუღებენ ქვაბში 10 წუთის განმავლობაში, გაწურვენ მარლის ორ ფენაში. მიღებული სითხე იფილტრება და 2-ჯერ განზავებულია ონკანის წყლით. დაამატეთ 2% გლუკოზა და 1% პეპტონი, ჩაასხით სინჯარებში და გაასტერილეთ სამი ჭარბი წნევით 0,05 მპა 15 წუთის განმავლობაში.

ოსმოფილური საფუარის ზრდის საშუალება. დაახლოებით 1 ლიტრ გამოხდილ წყალს დაუმატეთ 200 გრ წინასწარ გახურებული თაფლი, 1 გრ კალიუმის დიფოსფატი, 0,5 გრ მაგნიუმის სულფატი, 0,5 გრ ამონიუმის ტარტრატი, 0,1 გრ ნატრიუმის ქლორიდი და 0,1 გრ კალიუმის ქლორიდი. ყველა კომპონენტი შერეულია და სტერილიზდება 0,1 მპა ჭარბი წნევის ქვეშ 20 წუთის განმავლობაში.

ჰალოფილური მზარდი საშუალება. გამოიყენეთ ჩვეულებრივი ხორც-პეპტონის საშუალებები 10-15-დან 20-30%-მდე სუფრის მარილის დამატებით. გარდა ამისა, მყარი საკვები ნივთიერებების წარმოებისას იზრდება აგარის პროცენტული რაოდენობა. სტერილიზაცია ტარდება 0,1 მპა ჭარბი წნევის ქვეშ 20 წუთის განმავლობაში.

გამდიდრების მედია. მიულერის გარემო. 4,5 გ ქიმიურად სუფთა ცარცს, რომელიც ადრე იყო სტერილური მშრალი სითბოთ, დაამატეთ 90 მლ MPB და სტერილიზაცია 0,1 მპა ჭარბი წნევის ქვეშ 20 წუთის განმავლობაში. მოამზადეთ: ა) ჰიპოსულფიტის ხსნარი (50 გრ სუფთა კრისტალურ ჰიპოსულფიტს ასხამენ 100 მლ გამოხდილ წყალს, 30 წუთის განმავლობაში სტერილიზებენ გამდინარე ორთქლს); ბ) იოდის ხსნარი (20 გ მეტალის იოდს და 25 გ კალიუმის იოდიდს ასხამენ 100 მლ გამოხდილ წყალში). თესვის წინ ნახარშს ცარცით სტერილურად უმატებენ 10 მლ ჰიპოსულფიტის ხსნარს და 2 მლ იოდის ხსნარს. შეანჯღრიეთ ნარევი თითოეული ინგრედიენტის დამატებისას. ჩაასხით სტერილურ სინჯარებში ან კოლბებში.

ოთხშაბათი კილიანი. 100 მლ ჩვეულებრივ MPB-ს გამოყენებამდე სტერილურად ემატება 1 მლ წყალხსნარი (1:1000) ბრწყინვალე მწვანე.